Полимеразная цепная реакция (ПЦР) на инфекции, передающееся половым путем (ИППП) в Киеве

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это один из самых точных и быстрых способов диагностики инфекционных заболеваний, передающихся половым путём. Она широко применяется в различных областях медицины, включая урологию, гинекологию, неонатологию и службу переливания крови.

ПЦР был изобретён американским биохимиком Кэри Маллисом в 1986 году. За это изобретение Маллис получил Нобелевскую премию по химии в 1993 году.

Более 30 видов бактерий, вирусов и простейших могут передаваться через сексуальный контакт, включая вагинальный, оральный и анальный секс. Эти возбудители объединены в категорию "инфекции, передающиеся половым путём" (ИППП). Наиболее распространённые среди них — сифилис, гонорея, хламидиоз, трихомониаз, вирус простого герпеса, а также другие вирусы .

Некоторые инфекции могут также передаваться другими путями, например, через кровь или от молока кормящей матери ребенку.

Признаки инфекций, передающихся половым путем (ИППП)

Симптомы инфекций могут проявляться в виде выделений из влагалища или уретры, ощущения жжения при мочеиспускании, язв на половых органах и болей в области живота.

Однако некоторые ИППП могут протекать бессимптомно, что усложняет своевременную диагностику и лечение. Это может привести к осложнениям и продолжению распространения заболеваний.

Серьезные последствия инфекций включают:

• Передачу заболевания от матери к ребенку, что может привести к выкидышу, недоношенности, низкому весу новорожденного, сепсису, пневмонии, конъюнктивиту и врожденным аномалиям.
• Бесплодие.
• Около 14 штаммов вируса папилломы человека (ВПЧ) являются онкогенными и могут вызвать рак шейки матки, особенно ВПЧ типов 16 и 18.

Важно отметить, что многие ИППП, такие как сифилис, хламидиоз, трихомониаз и гонорея, полностью излечимы. В случае вирусных инфекций, таких как ВПЧ и ВИЧ, терапия может значительно облегчить симптомы и улучшить качество жизни пациента.

Что такое метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это метод, основанный на многократном увеличении числа копий определенного участка ДНК или РНК. Этот процесс получил название направленной амплификацией, и его эффективность достигается за счет значительного увеличения количества копий специфической нуклеотидной последовательности в пробе в 106-108 раз. Это обеспечивает высокую чувствительность метода.

Для проведения ПЦР необходимы:

• Фермент ДНК-полимераза, полученный из термофильных бактерий и устойчивый к высоким температурам.
• Праймеры, которые служат начальным пунктом для синтеза новых цепей ДНК.
• Нуклеотиды, которые являются строительными блоками ДНК.
• Буферный раствор.
• Прибор, который обеспечивает нужную температуру для реакции.

Метод состоит из следующих этапов:

1. Денатурация, когда двухцепочечная ДНК нагревается до 94-96°C, что приводит к разделению цепей.
2. Отжиг праймеров, когда температура снижается, позволяя праймерам связываться с разделенными цепями ДНК.
3. ДНК-полимераза начинает удваивать ДНК, используя праймеры как стартовые точки.

Если вирусы содержат генетический материал в виде РНК, используют ПЦР с обратной транскрипцией. Перед стандартной ПЦР молекула РНК с помощью фермента обратной транскриптазы преобразуется в комплементарную ДНК, которую затем можно амплифицировать стандартным методом.

Диагностики методом ПЦР

Диагностика методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) включает несколько этапов:

1. Забор материала. Материал для исследования может быть взят из различных источников, в зависимости от вида инфекции или заболевания. Например, образцы крови, мазок из уретры или влагалища, слюна или другие образцы тканей.
2. Транспортировка и хранение материала. Собранный материал необходимо доставить в лабораторию для дальнейшего исследования. При транспортировке материал можно хранить при комнатной температуре до двух часов или в холодильнике при температуре 2-8°C до 24 часов.
3. Выделение ДНК из материала. В лаборатории из собранного образца выделяют ДНК для дальнейшего анализа.
4. Амплификация ДНК. Для увеличения количества копий специфической ДНК из материала используют амплификационные смеси и проводят процесс в термостате, который поддерживает нужную температуру для реакции. Процесс амплификации длится около 2-3 часов.
5. Интерпретация результатов. После завершения амплификации результаты анализируют с помощью электрофореза, при котором используется бромистый этидий, соединение, связывающееся с ДНК и дающее свечение при освещении ультрафиолетовым светом. Наличие светящихся участков свидетельствует о положительном результате.
6. Количественная ПЦР. В некоторых случаях врач может назначить количественную ПЦР, чтобы оценить степень активности процесса. Так врач оценит количество патогенов в образце и назначить правильное лечение.

Таким образом, метод ПЦР обеспечивает высокую чувствительность и точность в диагностике инфекций, передающихся половым путём, и других заболеваний.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) имеет как преимущества, так и недостатки

Преимущества:

• ПЦР позволяет обнаружить даже небольшие количества ДНК или РНК патогенных организмов, что делает его особенно полезным в диагностике инфекционных заболеваний на ранних стадиях.
• Метод позволяет выявить уникальные генетические последовательности, характерные только для определенных видов возбудителей, исключая перекрестные реакции.
• Время проведения анализа сравнительно короткое — около нескольких часов, что позволяет быстро получить диагностическую информацию.
• ПЦР можно проводить с использованием разных типов образцов, включая кровь, мочу, мазки, смывы, соскобы и другие.

Недостатки:

• Амплификация ДНК погибшего микроорганизма. ПЦР может выявлять ДНК или РНК мертвых микроорганизмов. Поэтому, для контроля эффективности лечения, тестирование следует проводить через 1-2 месяца после окончания терапии, чтобы убедиться в полной элиминации возбудителей.
• Изменчивость и мутация микроорганизмов.: Быстрая мутация некоторых микроорганизмов может снизить эффективность ПЦР, если изменения затронут последовательности, используемые в диагностике.

Несмотря на некоторые недостатки, ПЦР остается одним из наиболее эффективных и точных методов диагностики и играет важную роль в медицине благодаря своей чувствительности, специфичности и быстроте получения результатов.

Записаться на прием